Низкая цена
Всего 249a за скачивание одной диссертации
Скидки
75 диссертаций за 4900a по акции. Подробнее
О проекте

Электронная библиотека диссертаций — нашли диссертацию, посмотрели оглавление или любые страницы за 3 рубля за страницу, пополнили баланс и скачали диссертацию.

Я впервые на сайте

Отзывы о нас

Определение некоторых моно- и сесквитерпенов в растительном сырье и продуктах его переработки методом хромато-масс-спектрометрии : диссертация ... кандидата химических наук : 02.00.02

Год: 2013

Номер работы: 1930

Автор:

Стоимость работы: 249 e

Без учета скидки. Вы получаете файл формата pdf

Оглавление и несколько страниц
Бесплатно

Вы получаете первые страницы диссертации в формате txt

Читать онлайн
постранично
Платно

Просмотр 1 страницы = 3 руб



Оглавление диссертации:

ВВЕДЕНИЕ Актуальность темы. Биологически активные вещества, выделяемые из растительного и животного сырья, составляют основу современной медицины. Большинство новых медицинских препаратов основано на веществах, выделяемых из природных объектов, и их доля по сравнению с полностью синтетическими препаратами неуклонно возрастает. При этом предсказать или априорно рассчитать биологическую активность того или иного соединения с высокой надежностью практически невозможно. Существующие компьютер

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНАЯ ЧАСТЬ.

1.1 Классификация биологически активных веществ древесного растительного сырья. Состав древесного растительного сырья является сложным и непостоянным и зависит от ряда факторов [1,2], среди которых:

- видовой состав древесных растений;

- природно-климатические условия произрастания древесных растений;

- экологическая характеристика окружающей среды. Биологически активные вещества древесного растительного сырья имеют большое значение для жизнедеятельности самого растения: у

. Обширную группу природных соединений, в основе структуры которых лежит изопреновый, а точнее изопентановый фрагмент (насыщенный или ненасыщенный), относят к изопреноидам, выделяя в ней терпены и их производные (терпеноиды), смоляные кислоты, стероиды и полиизопреноиды. Структура любого изопреноида может быть графически разбита на изопентановые фрагменты, это нашло отражение в «изопреновом правиле», сформулированном Валлахом в 1887 г. и дополненном впоследствии Ружичкой [11]. Кроме того, и

. Монотерпены входят в состав живицы и являются основной частью скипидаров и эфирных масел растений [17, 18]. Ациклические монотерпены встречаются сравнительно редко и в небольших количествах. Они имеют углеродный скелет 2,6-диметилоктана и содержат три двойные связи. Важнейший представитель - мирцен. В древесном растительном сырье встречаются главным образом моноциклические монотерпены с двумя двойными связями (в том числе весьма распространённый пинен) и бициклические монотерпены с одной

. К физико-химическим методам переработки природного растительного сырья относятся:

- перегонка с водяным паром, водой, спиртом;

- экстракция органическими растворителями;

- анфлераж. Использование того или иного способа зависит от строения и других особенностей сырья, количества и состава биологически активных веществ, подлежащих извлечению, локализации биологически активных веществ, распределения их по органам растения. Перегонка с водой - один из первых и в настоящее врем

. К основному методу анализа терпеновых углеводородов относится газовая хроматография (ГХ, в России распространено сокращение ГЖХ газожидкостная хроматография) [39, 40]. Этот метод позволяет эффективно разделять сложные смеси летучих биологически активных веществ, с последующим детектированием. Для анализа эфирных масел и растительных экстрактов методом газо-жидкостной хроматографии в настоящее время используются набивные практически исключительно и стекла капиллярные колонки, а применяются т

Определение состава растительных экстрактов, и эфирных масел в том числе, является, как правило, очень, сложной задачей из-за того, что анализируемая смесь состоит из многих компонентов, имеющих различную химическую природу [29]. В результате газохроматографического эксперимента исследуемая смесь разделяется на компоненты, и в идеальном случае каждый компонент характеризуется определённым временем удерживания. Изучаемая смесь может содержать как уже известные, так и ещё неизвестные вещества

. В хроматомасс-спектрометрии на выходе газового хроматографа установлен масс-спектрометр, который выполняет функцию детектора. При этом к хроматографической информации о соединении добавляется массспектрометрическая, что позволяет одновременно определить качественный и количественный состав пробы. Масс-спектрометр как 1 -у детектор характеризуется очень высокой чувствительностью (до 10" г и ниже), высокой надежностью результатов и стабильной работой [62, 67]. Поскольку в капиллярно

ГЛАВА 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

.

-газовый хроматограф Agilent 7890А;

-масс-спектрометр Agilent 5975 С InertMSD;

-дозаторы автоматические Eppendorf;

-колбы плоскодонные вместимостью 250 и 500 см по ГОСТ 23932-90;

-пипетки вместимостью 1,0 и 5,0 см по ГОСТ 29227-91;

-цилиндры мерные вместимостью 100 и 500 см по ГОСТ 1770-74;

-весы аналитические Mettler Toledo ХР 205 DR;

-весы технические Kern EW 300-2;

-плотномер Mettler Toledo DE 40;

-рефрактометр Mettler Toledo RE

.

-древесная зелень Сосны обыкновенной (PinusSylvestris);

-древесная зелень Сосны сибирской (PinusSibirica);

-древесная зелень Пихты сибирской (AbiesSibirica);

-древесная зелень Можжевельника сибирского (Juniperus Sibirica);

-спирт этиловый, 96%;

-гексан, ХЧ;

-а-пинен, ГСО для хроматографии, 99,9%;

-у-кадинен, СОП, 98,9%;

-фильтры обеззоленные «Синяя лента»;

-Na 2 S0 4 безв.

. Зачастую, перед аналитической химией стоит задача определить биологически-активные вещества не непосредственно в растении, а в различных товарных продуктах (препаратах), полученных из растительного сырья эфирных маслах, экстрактах, настойках и т.п. Терпеновые соединения являются основными действующими веществами целого ряда таких препаратов, и для достоверного определения терпеноидов требуется определённая пробоподготовка для каждого вида продукта (препарата). Чаще всего терпены извлекают

. Более сложной аналитической задачей является определение содержания терпенов в растительном сырье. Это необходимо при решении вопроса о заготовке того или иного вида сырья, или для оценки перспектив использования растения с целью интродукции. При этом главной проблемой является максимально полное извлечение летучих соединений, которое, однако, не должно сопровождаться появлением артефактов. В рамках данной работы были апробированы разные варианты извлечения терпеноидов - с использованием п

. Общеизвестно, что содержание в воздухе терпеноидов определяет целебные свойства хвойных лесов, потому что в данном случае терпены выступают в качестве фитонцидов [20]. Эмиссия терпенов древесной зеленью - это основной процесс попадания терпеноидов в воздух лесных массивов. Для изучения эмиссии терпенов древесной зеленью использовали климатическую осуществляли камеру, куда помещали образцы древесной зелени, и пропускание через камеру азота. Концентрирование осуществляли в этиловый спирт: в

Для определения терпеноидов использовали метод хроматомасс- спектрометрии. В работе использовался газовый хроматограф Agilent 7890 А, работающий в паре с квадрупольным масс-спектрометром Agilent 5975 С Inert MSD. Идентификацию соединений по полученным масс-спектрам проводили с использованием библиотек масс-спектрометрических данных и атласов масс-спектров, а также путем вычисления линейных индексов удерживания и сравнения с индексами, приводимыми в библиотеках [85]. Количественный анализ [86

. Для количественного определения терпеноидов в определяемых образцах использовали метод внутренней нормировки, метод внешнего и внутреннего стандарта. Количественный расчёт методом внутренней (4) с нормировки производили по масс-хроматограммам по формуле использованием стандартных средств программного пакета Agilent MSD ChemStation. Результаты анализа разных фракций эфирного масла сосны сибирской представлены в таблице 6. Таблица 6. Количественный состав разных фракций эфирного масла с

2.8. Количественное определение нескольких терпенов с использованием одного стандарта. В данной работе выдвинута гипотеза, что отклик масс-спектрометра на изомерные терпеновые соединения, закономерности фрагментации которых при масс-спектрометрическом равным. Это детектировании позволит одинаковы, является один приблизительно использовать только стандартный образец для количественного определения нескольких изомерных терпенов. Среди множества терпеновых соединений выделяли гр

2.9. Определение факторов отклика с использованием хроматографии с пламенно-ионизационным детектированием. газовой Несмотря на то, что определяемые группы монои сесквитерпенов имеют подобную структуру и их масс-фрагментация подчиняется одним закономерностям, вероятность их ионизации, выражающаяся количественно как сечение ионизации, зависит от множества факторов и может непредсказуемо изменяться даже для соединений, близких по структуре. Для снижения систематической составляющей погрешно

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Методика хромато-масс-спектрометрического определения монои сесквитерпенов в области высоких концентраций. Рабочие растворы (7 уровней концентрации) для построения градуировочного методом графика готовили из стандартных образцов терпенов разбавления с использованием гексана в последовательного качестве растворителя. Каждый раствор анализировался в 5 параллелях, относительное стандартное отклонение не превышало 3%. Результаты анализа калибровочных растворов представлены в таблице

3.2. Методика хромато-масс-спектрометрического определения монотерпенов в области низких концентраций. В качестве аналитического сигнала для определения а-пинена в режиме селективного ионного детектирования использовали площадь пика иона с m/z=93. Результаты калибровки представлены в таблице 22. Уравнения калибровочных кривых и коэффициенты регрессии для соответствующих диапазонов определяемых содержаний приведены в таблице 23, градуировочный график - на рисунке 22. Метрологические хара

. Представленные методики были использованы для анализа различных образцов товарного эфирного масла, производимых на территории РФ. Эфирные масла используются ввиду их антиоксидантной, противовоспалительной, противоопухолевой активности [101-106]. Были проанализированы пользующиеся широким спросом среди потребителей эфирные масла пихты сибирской, укропа пахучего и розмарина. Эфирное масло пихты обладает дезодорирующим, различных регенерирующим антисептическим, тонизирующим, [107]. Эффектив

3.4. Оценка содержания биологически-активных веществ терпеновой природы в растениях Сибирского региона. Были использованы два метода пробоподготовки - исчерпывающая пародистилляция и экстракция растворителями различной полярности для определения содержания монои сесквитерпенов в древесной зелени сосны сибирской (кедровой). Представляло интерес сравнить эти два метода обработки древесной зелени с точки зрения полноты извлечения терпеноидов и отсутствия в получающихся продуктах артефактов