Низкая цена
Всего 249a за скачивание одной диссертации
Скидки
75 диссертаций за 4900a по акции. Подробнее
О проекте

Электронная библиотека диссертаций — нашли диссертацию, посмотрели оглавление или любые страницы за 3 рубля за страницу, пополнили баланс и скачали диссертацию.

Я впервые на сайте

Отзывы о нас

Строение и биологическая активность вторичных метаболитов факультативных морских грибов рода Aspergillus : диссертация ... кандидата химических наук : 02.00.10

Год: 2013

Номер работы: 2114

Автор:

Стоимость работы: 249 e

Без учета скидки. Вы получаете файл формата pdf

Оглавление и несколько страниц
Бесплатно

Вы получаете первые страницы диссертации в формате txt

Читать онлайн
постранично
Платно

Просмотр 1 страницы = 3 руб



Оглавление диссертации:

К эколого-физиологической группе морских грибов можно отнести все организмы этого царства, растущие и размножающиеся тем или иным способом в морских и близких к ним местах обитания, принимающие участие в процессах биосинтеза, деструкции и модификации веществ в морских биоценозах. Океан, обеспечивающий стабильную окружающую среду с минимальными изменениями температуры и солености, плюс сравнительно небольшое число хозяев и субстратов не оказали сильного селективного давления в ходе эволюции дл

Грибы рода Aspergillus являются богатым источником биологически активных алкалоидов. Среди них огромное семейство составляют пренилированные индольные алкалоиды, содержащие индол/индолин и изопреновые группы и структуры, полученные из этих фрагментов (рис. 1). Биогенетическим предшественником индольной/индолиновой системы является L-триптофан. Кроме него, большинство представителей этой группы алкалоидов содержат вторую аминокислоту и образуют дикетопиперазиновую или бицикло[2,2,2]диазооктано

Нерибосомальный пептидный синтез в микроорганизмах является ключевым механизмом необычные включаются в образовании вторичных метаболитов пептидной N-, природы. С-, ОНерибосомальные пептиды содержат от 2 до 15 аминокислот и часто включают в себя аминокислоты (гетероциклические, ненасыщенные, метилированные и др.) или аминокислоты с D-конфигурацией. Часто в их состав заместители непептидной природы - остатки жирных кислот или углеводов. Для них характерны в основном циклические или разветвлено-

В химии природных соединений чрезвычайно важную роль играют биосинтетические процессы, ведущие к образованию изопренового скелета, так как последний служит структурным фрагментом, с участием которого в ходе реакций вторичного метаболизма строятся молекулы большого числа природных веществ, получивших название изопреноиды (терпеноиды). Молекула изопрена (2метилпентадиена-1,3) состоит из пяти атомов углерода, поэтому в углеродных скелетах многих изопреноидов их количество кратно пяти. В основу

Проведенный в лаборатории химии микробных метаболитов скрининг экстрактов изолятов морских грибов из донных осадков, водорослей и макроорганизмов Охотского моря позволил отобрать наиболее перспективные штаммы микроорганизмов для дальнейших химических исследований. Штаммы грибов наращивались в небольших количествах на различных средах и по результатам тонкослойной хроматографии их этилацетатных экстрактов были выбраны образцы, наиболее богатые по качественному и количественному составу метабол

3.2. Установление строения индивидуальных соединений из A. carneus КММ 4638 Штамм гриба Aspergillus carneus КММ 4638 был выделен из морской бурой водоросли Laminaria sachalinensis (Miyabe), собранной на глубине

1.5 м возле острова Кунашир (Курильские острова, Охотское море). 42 Сухой остаток, полученный после упаривания этилацетатного экстракта культуры, делили на колонке с силикагелем и далее методом ВЭЖХ на обращенно-фазной колонке Supelco Discovery С-18 (см. экспериментальную часть

4640 Штамм гриба Aspergillus sulphureus КММ 4640 был выделен из илистого песка, собранного на глубине 26 м (восточносахалинский шельф, Охотское море). Сухой остаток, полученный после упаривания этилацетатного экстракта культуры, делили на колонке с силикагелем и далее методом ВЭЖХ на обращенно-фазной колонке Supelco Discovery С-18. В результате были выделены одно новое декалиновое производное декумбенон С (180) и четыре известных метаболита: декумбеноны А (181) и В (182), диорцинол (183) и бр

4631 Штамм гриба Aspergillus fumigatus КММ 4631 был выделен из мягкого коралла Sinularia sp., собранного на глубине 52 м у берегов острова Кунашир, Курильские острова, Охотское море. Сухой остаток, полученный после упаривания этилацетатного экстракта культуры, делили на колонке с силикагелем и далее методом нормально-фазной ВЭЖХ на колонках Hypersil Si и Diasorb-130-Sil и обращенно-фазной ВЭЖХ на колонке Supelco Discovery С-18. В результате были выделены новые алкалоиды - спиротрипростатин F

Изучение цитотоксической активности в отношении линий опухолевых клеток Т47D, SK-Mel-5, SK-Mel-28 и НСТ-116 и действия на рост колоний некоторых клеток было проведено с.н.с, к.х.н. Ермаковой СП. и м.н.с, к.х.н. Вищук О.С. (Лаборатория химии ферментов ТИБОХ ДВО РАН). Антимикробная активность в отношении грамположительных, грамотрицательных бактерий и дрожжей была исследована н.с, к.б.н. Киричук Н.Н. (Лаборатория микробиологии ТИБОХ ДВО РАН). Изучение цитотоксической активности в отношении несп

4638 Цитотоксическое действие карнеамидов А (150) и В (151) и карнехиназолинов А (160) и В (153) было изучено в отношении трех линий опухолевых клеток: рака молочной железы человека (T-47D) и меланомы (SK-Mel-5 и SK-Mel-28) с помощью MTS-метода. Результаты показали, что исследуемые алкалоиды не проявляют активности в концентрациях < 100 мкМ. Цитотоксическая активность в отношении клеток асцитной карциномы Эрлиха была исследована для карнехиназолина D (155), дигидроцинереаина (156), цинереа

3.5.2. Биологическая активность некоторых вторичных метаболитов А. sulphureus КММ 4640 Цитотоксическая активность декумбенонов А (181), В (182) и С (180) и диорцинола (183) in vitro была изучена в отношении клеток рака кишечника человека (НСТ-116) и меланомы человека (SK-Mel-5 и SK-Mel-28) с помощью MTS-метода. Полученные результаты приведены в таблице 13. Диорцинол проявляет слабый эффект в отношении клеток НСТ-116 с ИК5о

22.8 мкМ. Декумбеноны А-С в концентрациях до 100 мкМ были нетокс

4631 Фумихиназолин К (185) и 29-нордаммарановый тритерпеноид (186) в концентрации 4 мг/мл не показывает антимикробной активности в отношении грамположительных бактерий Staphylococcus aureus АТСС 21027 и Bacillus cereus АТСС 10702, грамотрицательных бактерий Pseudomonas aeruginosa АТСС 27853 и Escherichia coli АТСС 15034 и дрожжевых грибов Candida albicans КММ 453. Цитотоксическая активность в отношении неспецифической эстеразы клеток карциномы Эрлиха, а также действие на мультилекарственную у

Оптическое вращение измеряли на поляриметре «Perkin Elmer 343» (Германия) в метаноле. КД-спектры регистрировали на спектрополяриметре «Jasco 500А» в метаноле. УФ-спектры записывали на спектрофотометре «Shimadzu UV-1601 PC» (Япония) в метаноле. ИК-спектры получены на спектрофотометре «Bruker OPUS Vector-22» в четыреххлористом углероде и хлороформе. Спектры ЯМР 'Н, 13 С и 1 5 N регистрировали на спектрометрах «Bruker DRX-500» (500, 125 и 50 МГц, соответственно) и «Bruker Advance III 700» (700,

Колоночную хроматографию проводили на силикагеле L (40/100 мкм, Chemapol, Чехословакия). Тонкослойную хроматографию (ТСХ) проводили на силикагелевых пластинках (

4.5 х

6.0 см, Сорбполимер, Россия) с закрепленным на фольге слоем силикагеля СТХ-1А (5-17 мкм) в системе толуол-изопропанол 6:1, в качестве проявителя использовали концентрированную H2SO4. ВЭЖХ проводили на хроматографах «Beckman-Altex» с рефрактометром «RIDK102» и «Agilent 1100» с УФ детектором «Variable Wavelenght», исп

Штамм гриба Aspergillus carneus КММ 4638 был выделен с поверхности морской бурой водоросли Laminaria sachalinensis (Miyabe), собранной на глубине

1.5 м возле острова Кунашир (Курильские острова, Охотское море). Гриб был идентифицирован на основании морфологических данных д.б.н., в.н.с. Пивкиным М.В. (лаборатория микробиологии ТИБОХ ДВО РАН). Штамм гриба Aspergillus sulphureus КММ 4640 был выделен из илистого песка, собранного на глубине 26 м (восточносахалинский шельф, Охотское море). Г

4638 По окончании инкубационного периода мицелий гриба вместе со средой измельчали и трижды экстрагировали этилацетатом (2 л). Экстракт концентрировали в вакууме, полученный сухой остаток растворяли в системе метанол-вода (1:4,

0.1

л) и последовательно экстрагировали гексаном (

0.1 л х 3 раза) и этилацетатом (

0.1 л х 3 раза). Объединенный этилацетатный экстракт упаривали досуха, остаток (

1.5

г) 85 хроматопэафировали на колонке с силикагелем (4 х 20

4640 По окончании инкубационного периода мицелий гриба вместе со средой измельчали и трижды экстрагировали этилацетатом (2 л). Экстракт концентрировали в вакууме, полученный сухой остаток растворяли в системе метанол-вода (1:4,

0.1

л) и последовательно экстрагировали гексаном (

0.1 л х 3 раза) и этилацетатом (

0.1 л х 3 раза). Объединенный этилацетатный экстракт упаривали досуха, остаток (

1.6

г) хроматографировали на колонке с силикагелем (4 х 20

см)

4.6. Выделение соединений mA.fumigatus КММ 4631 + По окончании инкубационного периода мицелий гриба вместе со средой измельчали и трижды экстрагировали этилацетатом (2 л). Экстракт концентрировали в вакууме, полученный сухой остаток растворяли в системе метанол-вода (1:4,

0.1

л) и последовательно экстрагировали гексаном (

0.1 л х 3 раза) и этилацетатом (

0.1 л х 3 93 раза). Объединенный этилацетатный экстракт упаривали досуха, остаток (

1.2

г) хроматографи

4.7.1. Определение цитотоксической активности и действия на формирование и рост колоний опухолевых клеток T-47D, SK-Mel-5, SK-Mel-28 и НСТ-116 Материалы для биоиспытаний. Клеточные линии НСТ-116 ( АТСС # CCL-247), Т47D (АТСС # НТВ-133), SK-MEL-28 (АТСС # НТВ-70) и SK-MEL-5 (АТСС # НТВ-72) из АТТС (Американской Коллекции Клеточных Культур). Питательные среды McCoy 5а (McCoy), DMEM, RPMI-1640, фосфатный буфер, пенициллин, стрептомицин, бычий сывороточный альбумин (FBS), L-глутамин, трипсин, гид

Материалы для биоиспытаний. Клетки асцитной карциномы Эрлиха, питательная среда RPMI-1640, гентамицин и SDS-HC1. Культивирование клеток. Клетки асцитной карциномы Эрлиха выделяли из асцита, полученного на 7-й день после инокуляции мышам линии CD-I. Клетки отмывали от асцита трижды, затем ресуспендировали в среде RPMI-1640 с гентамицином 8 мкг/мл (БиолоТ, С.

-Петербург, Россия). 96 Определение цитотоксической активности. Цитотоксическую активность вещества определяли методом МТТ [131].