Низкая цена
Всего 249a за скачивание одной диссертации
Скидки
75 диссертаций за 4900a по акции. Подробнее
О проекте

Электронная библиотека диссертаций — нашли диссертацию, посмотрели оглавление или любые страницы за 3 рубля за страницу, пополнили баланс и скачали диссертацию.

Я впервые на сайте

Отзывы о нас

Активность альдегиддегидрогеназы печени и эритроцитов крыс в норме и при ожоговой токсемии : диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.13, 03.00.04

Год: 2005

Номер работы: 64117

Автор:

Стоимость работы: 249 e

Без учета скидки. Вы получаете файл формата pdf

Оглавление и несколько страниц
Бесплатно

Вы получаете первые страницы диссертации в формате txt

Читать онлайн
постранично
Платно

Просмотр 1 страницы = 3 руб



Оглавление диссертации:

Проблема термической травмы относится к числу важных и неотложных в современной практической и теоретической медицине. Обширный глубокий ожог вызывает разност<фонние, длительные и своеобразные функциональные и морфологические изменения внутренних органов и систем организма. Поэтому в медицине упрочилось понятие "ожоговая болезнь" (Федоров и др., 1985; Р1ижеваткии и ;ф., 2000). Ожоговая болезнь - специфический симптомокомплСкс, развивающийся после термической травмы и сопровождающ

1.1.2.Возникновение первичных токсинов при ожоговой болезни Н.А. Федоров и др. (1985) выдвинули гипотезу о том, что ожоговый токсин образуется в обожженной коже как продукт денатурации тканевых или сывороточных белков и обладает аутоантигенными и токсическими •V свойствами. Отмечено, что интоксикация и глубокие функциональные нарушения в обожженном организме выявляются одновременно уже в первые часы после ожога (Fang et al., 1999; Ulrich et al., 2001). H.A. Федоров и др.(1985) указывают на т

1.1.3 .Роль печени в процессе детоксикашш при ожоговой болезни После ожогов возЕшкают глубокие структурные и функциональные изменения в печени. Нарушение функции печени соответствует тяжести клинической картины, величине и глубине ожога (Инжеваткин и др., 2000; Парамонов и др., 2000). Функциональные изменения в печени возникают у всех ^i^x обожженных, даже имеюпщх небольшую площадь ожога. Антитоксическая функция печени снижается уже в первые часы ожоговой болезни (Федоров и др.. 1985). Через

Несмотря на то, что в процессе биотрансфрмации веществ в конечном итоге образуются менее токсичные соединения, многие промежуточные продукты I и II стадии могут обладать высоким гепатоксическим эффектом. На I стадии биотрансформации ксенобиотиков большую опасность представляет образование реактивных продуктов восстановления кислорода, связанное в основном с пероксидазной активностью цитохрома Р-450, Их источником может быть дисмутация супероксидного аниона, высвобождаемого при диссоциации окс

1.2. Альдегиддегидрогеназа Альдегиддегидрогеназы (альдегид: НАД(Ф)*-оксидоредуктазы) - группа ферментов, катализирующих превращение альдегидов до соответствую­ Г щих кислот, Альдегиддегидрогеназы широко распространены в животном мире: от бактерий (Ahvazi et al., 2000) до млекопитаюпщх (Сатановская, 1990; Yoshidaetal., 1998). Многие ткани млекопитающих содержат АлДГ: печень, почка, матка, надпочечники, половые железы, тонкий кишечник, мозг, сердце, жировая vткань, легкие (ткани расположены

2.1. Постановка эксперимента С целью решения поставленных задач проведены серии экспериментов, в которых осуществлялось: 1 - определение активности оксидоредуктаз (альдегиддегирогеназы, лактатдегидрогеназы и алкогольдегидрогеназы) в печени и эритроцитах крыс после термической травмы; 2 - изучение влияния "молекул средней массы" на активность оксидоредуктаз в опытах in vitro и при внутрибрюшинном введении МСМ крысам; 3 - изучение влияния глицина на активность АлДГ и оксидоредуктаз в

2.2.Методы исследования

Митохондриальные и цигоплазматические фракции клеток печени экспериментальных животных получали методом дифференциального центрифугирования (Бщенко, 1982; Осадчая,1982; Финдлей, Эванз,1990). После декапитации крыс под эфирным наркозом вскрывали брюшную полость, печень быстро извлекали, отмывали от крови, много1фатно перфузируя ее охлажденным физиологическим раствсфом с помопцло толстой иглы и шприца на 10 мл. Промытую печень помещали в стоящую на льду чашку Петри и измельчали ножницами. В сте

(ацетальдегид:НАД-оксидоредуктаза; КФ

1.2.

1.3.) Определение активности фермента с использованием в качестве субстрата ацетальдегида (прямая реакция) проводили по методу Б.М. Кершенгольц и Е.В. Серкиной (1981). Активность альдегиддегидрогеназы определяли спектрофотометрически по регистрации начальной скорости образования НАДН при дегидрогеназном окислении ацетальдегида в качестве субстрата. Ход определения активности. В спектрофотометрическую кювету помещали 2,8 мл 0,1М глицин-щел

(Ь-лактат:НАД-оксидоредуктаза; КФ

1.1.

1.27.)

А) Определение активности фермента с использованием в качестве субстрата молочной кислоты (прямая реакция - ЛДГпр) по методу Г.А. Ко^ четова (1980). При действрш ЛДГ на молочную кислоту происходите окисление, что сопровождается восстановлением НАД. Ход определения активности. В спетрофотометрическую кювету помещали 2,7 мл ЮОмМ глицинового буфера (рН 9,6); 0,1 мл раствора, содержащего фермент; 0,1 мл 50мМ лактата лития; 0,1 мл 20

4. Определение активности алкогольдегшц)огеназы (алкоголыНАД-оксидоредуктаза; КФ

1.1.

1.1.) Определение активности фермента с использованием в качестве субстрата ацетальдегида (обратная реакция - АДГобр) по методу М. Koivusaloetal. (1989). Активность АДГ оценивали по скорости окисления НАДН, которое регистрируется спектрофотометрически по убыли величины оптической плотности при длине волны 340 нм. Ход определения активности. В спектрофотометрическую кювету помещали 2,7 мл 100 мМ ф

3.1. Активность и кинетические показатели альдегидг^вгидрогеназы печени и эритроцитов крыс в норме и при ожоге В проведенных опытах было показано, что основная активность АлДГ интактных животных обнаруживается в цитоплазматической фракции печени, в которой сосредоточено 71% суммарной активности АлДГ, в М1митохондриях - 10%, в М2-митоходриях 19%. Расхфеделение активности АлДГ у животных с термической травмой аналогично распределению активности альдегиддегидрогеназы в печени интактных крыс (рис

3.2. Активность и кинетические свойства альдегшшегидрогеназы печени и эритроцитов крови крыс при введении им "молекул средней массы" В модельных экспериментах нами было показано, что

введение МСМоп вызывает снижение активности АлДГ в гомогенате, цигоплазматической. Ml и М2-мигохондриальных фракциях соответственно на 27%, 45%, 50%, 79% по сравнению с МСМнп.

Введение же крысам внутрибрююинно МСМнп приводнг к увеличению активности АлДГ в печени (табл. 6). Таблица 6 Измен