Низкая цена
Всего 249a за скачивание одной диссертации
Скидки
75 диссертаций за 4900a по акции. Подробнее
О проекте

Электронная библиотека диссертаций — нашли диссертацию, посмотрели оглавление или любые страницы за 3 рубля за страницу, пополнили баланс и скачали диссертацию.

Я впервые на сайте

Отзывы о нас

Исследование ассоциации ряда генов-кандидатов с хроническим гломерулонефритом : диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.03

Год: 2006

Номер работы: 71726

Автор:

Стоимость работы: 249 e

Без учета скидки. Вы получаете файл формата pdf

Оглавление и несколько страниц
Бесплатно

Вы получаете первые страницы диссертации в формате txt

Читать онлайн
постранично
Платно

Просмотр 1 страницы = 3 руб



Оглавление диссертации:

1.1. Полиморфные маркеры.

1.1.1. Типы полиморфизмов и методы их исследования. Полиморфные маркеры нашли широкое применение в различных областях современной молекулярной генетики от физического картирования хромосом до ассоциации с заболеванием и идентификации личности. Полиморфизм представляет собой наличие нескольких аллельных вариантов гена или участка ДПК. Различают три варианта полиморфных участков ДНК: 1. ДНК; 2. Мононуклеотидные полиморфизмы, приводящие к появлению Полиморфные мини - и микросателлитные последов

. Изучение наследственной предрасположенности к многофакторным заболеваниям крайне важно для их диагностики и терапии. Для данных заболеваний характерен сложный механизм формирования фенотипа, в основе которого лежит взаимодействие генетических факторов с факторами внешней среды. Фенотипом, в данном случае, называется совокупность клинических признаков и метаболических нарушений, обусловленных представляет данным генотипом. Наибольшую практическую ценность исследование полиморфных маркеров

. Хронический гломерулонефрит (ХГН) - сборная группа заболеваний, разных по происхождению и морфологическим проявлениям. Заболевание характерезуется воспаленим генетически обусловленным которое иммунно-опосредованным может сопровождаться почечных клубочков, вовлечением в патологический процесс всех почечных структур, развитием почечной недостаточности, сморщиванием почки, развитием артериальной гипертензии, а так же может приводить к смерти от хронической почечной недостаточности {http//ag

1.2.1. Классификация хронического гломерулонефрита. До настоящего времени нет единой общепринятой классификации гломерулонефритов. Это связано с разным подходом к данной проблеме и неоднородностью существующих критериев. Очевидно, следует согласиться с точкой зрения о том, что гломерулонефриты являются разнообразной по своему происхождению группой заболеваний почек, для которых характерно поражение всех отделов нефрона. Учитывая возможные пути 16 развития, можно считать, что гломерулонефриты

1.2.2. Иммунные механизмы развитня гломерулонефрита. В развитии и прогрессировании ХГН наибольшее значение имеет иммунный механизм развития. Уже в 50-60 годы появились сообш;ения об обнаружении иммунных комплексов в клубочке и переферической крови (Dixonl961.). Развивая эту концепцию, в дальнейшем была разработана теория об иммуннокомплексном гломерулонефрите. (Рябов И.Р. 2000) Итак, совершенно ясно, что основным фактором механизма развития длительного хронического процесса является измененна

1.2.3. Генетические факторы риска развития хроиического гломерулонефрита. В последнее время большую популярность в изучении генетической предрасположенности к различным заболеваниям приобрел подход с использованием так называемых генов-кандидатов. Под последними подразумевают гены, чьи белковые продукты (ферменты, регуляторные белки и пептиды, структурные белки) могут быть хотя бы потенциально вовлечены в развитие какого-либо заболевания. Для каждой многофакторной и полигенной патологии оче

1.3. Характеристика исследованных в работе генов и иолиморфных маркеров.

1.3.1. Геи иодоцииа. Интегральный мембранный белок подоцин с молекулярной массой 42 кДа относится к стоматиновому протеиновому семейству и на 47% гомологичен стоматину человека. В основном подоцин экспрессируется в гломерулярных подоцитах и меньше - в яичках, фетальных тканях сердца и печени (Boute N et al., 2000). Подоцин, подобно «шпильке», замыкает нефрин в подоцитах, тем самым входит в единую структуру щелевой диафрагмы (ЩД) (Roselli S. et al., 2002; Schwarz К. et al., 2001) и подобно не

. Нефрин является основным белком щелевой диафрагмы (ЩД), он связывает два рядом расположенных подоцита (Holzman LB. et al., 1999). 25 Обнаружение нефрина в составе ЩД дало новое понимание клубочкового фильтра и роли ЩД как заключительного фильтрационного барьера для прохождения белка (Tryggvason К. 1999). Нефрин это трансмембранный белок, который относится к суперсемейству иммуноглобулинов с адгезивными функциями. Он состоит из 1241 аминокислотных остатков и его молекулярная масса составляе

. В настоящее время активно обсуждают значение генетических факторов в определении особенностей иммунного ответа на те или иные воздействия. В частности, особое внимание уделяют изучению роли полиморфных маркеров, расположенных среди генов главного комплекса гистосовместимости (МНС) класса П. Гены локуса МНС класса II: HLA-DQ, HLA-DR и HLA-DP расположены в хромосомной области 6р21 (рис.

6) и экспрессируются в клетках, представляющих антигены. (Levine et al., 1984). хромосомаб HLA кл

1.3.6. Ген поверхностного антигена цитотокснческих Т-лнмфоцнтов. Продукт экспрессии гена CTLA4 участвует в активации Т-клеток (Ношапп et al., 2006). Современная модель активации Т-клеток предполагает наличие двух сигналов (Kalergis et al., 2001). Первый специфический сигнал поступает в момент связывания комплекса МНС с антигеном, находящимся на поверхности клетки, представляющей антиген, с Т-клеточным рецептором (TCR), а второй, неспецифический сигнал поступает после соеденения другого рецепт

(ТР53) Белок р53 играет важную роль в регуляции транскрипции и клеточного цикла, он вовлечен в процесс апоптоза, связан с поддержанием геномной стабильности, взаимодействует со многими клеточными белками. Показано, что повреждение ДЕЖ приводит к накоплению р53, который в свою очередь блокирует репликации клеточный цикл в фазе G1, таким образом ДНК до белок репарации повреждения. к апоптозу. Если препятствуя повреждение и нерепарируемо, р53 приводит При стрессах повреждениях клеток активно

{MDM2). Ключевую роль в стабилизации белка р53 и повышении его транскрипционной активности играют изменения во взаимодействии р53 с белком-ингибитором Mdm2 (Mendrysa et al., 2006), ген которого является потенциальным онкогеном (Zhang et al., 2006, Мушкамбаров и совт., 2003). Этот белок, представляющий связывается с N-концом собой специфическую молекулы р53 и убиквитин-лигазу, стимулирует его убиквитинирование и, как результат, протеасомную деградацию белка р53 (Fry et al., 2005). Кроме того

2.1. Реактивы и ферменты. Рестриктазы Bsul5l, EcolOSl, BseMil, Tail, EamllO4\, Mbol, Bshl236l производства НПО «Ферментас» (Литва). Рестриктазы MspAI, PspEl производства НПФ «Сибэнзим» (Новосибирск), Синтез олигонуклеотидов выполнен ФГУП ГосНИИ генетика (Москва). Дрожжевая тРНК, ДСН, бромистый этидий, - фирмы "Serva" (Германия). dATP, dCTP, dTTP, dGTP - производства НПО "Ферментас" (Литва). Протеиназа К, сахароза, агароза (Туре II), БСА, Тритон Х-100®, Твин-20, ДТТфирмы &

2.2. Буферные растворы: Буфер ТЕ (1х) — 10 мМ Трис-НС1 (рН=8,0), 1 мМ ЭДТА. Буфер ТАЕ (1х) — 40 мМ Трис-ацетат, 2 мМ ЭДТА. Буфер ТВЕ (1х) —

0.089 МТрис,

0.89 М борная кислота,

0.002 М EDTA (рН=

8.0).

2.3. Буферы для рестрикцин (1х): G -10 мМ Трис-НС1 (рН

7.5), 10 мМ хлорид магния, 50 мМ NaCl; О - 50 мМ Трис-НС1 (рН

7.5), 10 мМ хлорид магния, 10 мМ NaCl; R -10 мМ Трис-НС1 (рН

8.5), 10 мМ хлорид магния, 100 мМ КС1; 47 Y - 33 мМ Трис-ацетат (рН

7.9), 10 мМ ацетат магния, 66 мМ ацетат калия.

2.4. Формирование групп больных и здоровых ипдивпдов. Группа больных с хроническим гломерулонефритом была сформирована из числа пациентов в клинике нефрологии, внутренних и профессиональных болезней им. Е.М. Тареева ММА им. И.М. Сеченова, Детской Городской больнице №13 им Н.Ф. Филатова, а также в Научном Центре Здоровья Детей РАМН города Москвы. Клинико-лабораторные исследования проводились в межклинической биохимической лаборатории ММА им. И.М. Сеченова. Морфологическое исследование ткани п