Низкая цена
Всего 249a за скачивание одной диссертации
Скидки
75 диссертаций за 4900a по акции. Подробнее
О проекте

Электронная библиотека диссертаций — нашли диссертацию, посмотрели оглавление или любые страницы за 3 рубля за страницу, пополнили баланс и скачали диссертацию.

Я впервые на сайте

Отзывы о нас

Антирестрикционный белок ArdA, кодируемый трансмиссивной плазмидой IncI группы: мутационный анализ и изучение механизма действия : диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.03

Год: 2006

Номер работы: 71715

Автор:

Стоимость работы: 249 e

Без учета скидки. Вы получаете файл формата pdf

Оглавление и несколько страниц
Бесплатно

Вы получаете первые страницы диссертации в формате txt

Читать онлайн
постранично
Платно

Просмотр 1 страницы = 3 руб



Оглавление диссертации:

1 Плазмиды и бактериофаги, использова1И1ые в работе Ш.З. Среды для выращивапия бактерий и фагов Ш.

3.1. Жидкие среды III.

3.2. Твердые среды Ш.4. Антибиотики, растворы солей и реактивов

111.5. Выращивание культур бактерий

111.6. Выращивание бактериофагов

111.7. Высев бактерий и бактериофагов. Опыты по изучению эффективности рестрикции

111.7.1. Высев бактерий

111.7.2. Высев бактериофагов

111.7.3. Опыты по изучению эффективности рестрикции 2

2.1. Три типа систем рестрикции-модификации. Системы рестрикции-модификации довольно широко распространены среди бактерий и подразделяются в настоящее время на три больших класса в соответствии с их сложностью, требуемыми кофакторами, сайтом узнавания и положением места разрыва ДНК по отношению к сайту узнавания [30]. приведены на (рис.

3) и в (табл.1). Системы второго типа наиболее просты и состоят из двух отдельных ферментов, эпдонуклеазы и метилтрансферазы. Эндонуклеаза второго типа

2.2. Системы рестрикции-модификации 1-го тииа. Системы рестрикции-модификации 1-го типа являются мультифункциональными ферментами, которые способны катализировать как реакцию рестрикции, так и реакцию модификации ДНК. S-Аденозилметионип (SAM) является кофактором и донором метильной группы для метилтрапсферазной активности системы рестрикции-модификации 1-го типа. Для нуклеазной активности системы рестрикции-модификации 1-го типа требуется АТР, SAM и Mg^^. Сайт узнавания комплекса системы ре

2.2.1. Субьединица узнавания. Субъединицы узнавания родственных систем существенно отличаются друг от друга, примерно на 1400 аминокислотных остатков имеют только два консервативных участка, составляющих 30 и 80 аминокислот, соответственно. Сравнительный анализ пуклеотидных последовательностей генов субъединиц узнавания hsdS в пределах семейства IA обнаружил два длиппых вариабельных региона по 450-500 пар нуклеотидов, и, кроме того, некоторые небольшие различия в промежуточном консервативном

2.2.2. Субъсдипица модификации Субъединица модификации М (также как и субъединица узнавания S) необходима как для рестрикционной, так и для модификациионной активности системы. S- аденозилметионин (SAM) является донором метильной группы для модификации и служит существенным кофактором для рестрикции [55] В ранних экспериментах было показано, что SAM нрисоединяется к субъединице М комнлекса рестрикции-модификации EcoKJ [56]. В соответствии с этим аминокислотная последовательность, предсказанн

2.2.3. Модифициирующий фермент Комплекс, имеющий только метилтрансферазную активность, очищен для представителей трех семейств систем рестрикции-модификации 1-го тина (IA, IB и 1С). Стехиометрия этого активного комплекса M2S1 [66, 67]. Модифициирующий фермент 1-го типа катализирует перенос метильной группы с SAM на N-6 положение специфического аденинового остатка сайта узнавания. Три различных семейства систем рестрикции-модификации 1-го типа значительно отличаются способностью метилировать

2. Нолипептидные последовательности субъединиц рестрикции R имеют 20-30% идентичности между представителями четырех семейств систем рестрикции-модификации 1-го тина. Все эти последовательности, однако, включают мотивы, характерные для АТРсвязывающих белков, что согласуется с АТР-зависимостъю реакции рестрикции. Также имеются другие консервативные последовательности, указывающие на присутствие мотивов, ранее идентифицированных в АТР-зависимых геликазах [73]. Существует несколько семейств АТР-з

2.. Рестрикции комплекса ДНК предшествует АТР-зависимое конформационное изменение показано в опытах с рестрикции-модификации 1-го типа, как было экзонуклеазой III для системы EcoKI [81]. Система EcoKI является хорошо изученной с точки зрения сайт - специфичного присоединения, эффект кофактора SAM на представителей семейств Ш и 1С изучен мало из-за сложности отделения SAM от этих ферментов [82]. Система EcoKI присоединяется к ДНК в отсутствии АТР. Нри наличии сайта узнавания система покрыва