Низкая цена
Всего 249a за скачивание одной диссертации
Скидки
75 диссертаций за 4900a по акции. Подробнее
О проекте

Электронная библиотека диссертаций — нашли диссертацию, посмотрели оглавление или любые страницы за 3 рубля за страницу, пополнили баланс и скачали диссертацию.

Я впервые на сайте

Отзывы о нас

Методы магнитно-резонансной томографии в изучении ангиогенеза и его молекулярных маркеров : диссертация ... кандидата физико-математических наук : 03.00.02, 03.00.03

Год: 2006

Номер работы: 71704

Автор:

Стоимость работы: 249 e

Без учета скидки. Вы получаете файл формата pdf

Оглавление и несколько страниц
Бесплатно

Вы получаете первые страницы диссертации в формате txt

Читать онлайн
постранично
Платно

Просмотр 1 страницы = 3 руб



Оглавление диссертации:

Ангиогенезом называют формирование новых сосудов на базе существовавших ранее. Более 25 лет назад Judah Folkman впервые сформулировал основные положения теории взаимосвязи ангиогенеза и онкогенеза [1]: (i) большинство первичных солидных опухолей проходит через стадию небольшой аваскулярной массы (размерами 1-2 мм в диаметре), могущей длительное время находиться в неактивном, «спяшем» состоянии. При этом кислород и питательные вещества доставляются в процессе пассивной диффузии; (и) эти микроо

1.1.2 Механизмы ангиогенеза В эмбриогенезе сосуды формируются de novo из эндотелиальных прекурсоров (васкулогенез). Эндотелиальные клетки дифференцируются и размножаются в лишенной сосудов ткани, пока не объединяются и не формируют примитивную сосудистую сеть [7]. В нее входят основные сосуды эмбриона, такие как аорта и наиболее крупные вены, соединенные наподобие ячеек в пчелиных сотах. Изменение архитектуры сосудистой сети, такое как усложнение структуры, увеличение как самих сосудов, так

1.1.3 Особенности опухолевых сосудов Еще Дж. Фолкман предсказал, что сформированные в результате ангиогенеза сосуды будут отличаться от таковых в остальных тканях. Действительно, такие сосуды аномальны как структурно, так и функционально (см. Рис. 3). В отличие от нормальной сосудистой сети, которая четко структурирована, опухолевая в значительной мере хаотична. Для нее характерны многочисленные петли, переплетения, параллельные соединения и тупиковые ветви [11]. Сами сосуды при этом расширен

1.2.1 Ангиогенный «переключатель» В настоящее время гипотеза об «ангиогенном переключателе» является общепризнанной. Считается, что он находится в «выключенном» положении, когда преобладают анти-антиангиогенные факторы и включается, когда равновесие сдвигается в сторону ангиогенных [16]. В роли активаторов ангиогенеза выступают сосудистый эндотелиальный фактор роста VEGF, фактор роста фибробластов bFGF, рецептор эпителиального фактора роста (EGFR) и другие, а в роли эндогенных ингибиторов тро

1.2.2 Основной игрок: сосудистый эндотелиальный фактор роста (VEGF) и его рецепторы

2.1 VEGF - ключевой фактор ангиогенеза Десятилетия исследований в области молекулярных основ ангиогенеза выявили ряд сигнальных путей различных факторов роста и других семейств белков, которые сдвигают молекулярный «переключатель» в сторону ангиогенеза. Их принято называть проангиогенными (или просто «ангиогенными») факторами. Возможно, наиболее полно охарактеризованным и изученным ангиогенным фактором является сосудистый эндотелиальный фактор роста (также известный как фактор сосудистой прон

2. Семейство VEGF включает в себя 6 членов: VEGF-A, VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D, VEGF-E и плацентарный фактор роста P1GF (Рис. 6). VEGF-A (обычно называемый просто VEGF) был впервые идентифицирован Dvorak et al. [24]. как повышающий проницаемость сосудов фактор, выделяемый опухолевыми клетками. Позже Ferrara и сотрудники его лаборатории [25] выделили и клонировали VEGF-A как специфический эндотелиальный митоген. Нативный VEGF является основным связывающимся с гепарином гомодимерным гликопротеином'

Лиганды VEGF действуют посредством нескольких специфичных рецепторов. Два из них были изначально идентифицированы на эндотелиальных клетках - это VEGFR-1 (также известный как Flk-1) и VEGFR-2 (известный как KDR и его мышиный гомолог, Flt1 - их гомологичность составляет 85%). VEGFR-1 и VEGFR-2 также экспрессируются на многих линиях кроветворных состоящую из семи клеток взрослого организма. Гомологичность иммуноглобулиноподобных доменов, этих рецепторов составляет 44% и они имеют общую характер

На экспресию гена VEGF влияет несколько факторов, среди которых можно назвать гипоксию, цитокины или факторы роста (такие как EGF, TGF-P, интерлейкины), а также клеточная дифференциация и трансформация [35]. Рассмотрим эти факторы по отдельности. Гипоксия Исследования показали, что вызываемый гипоксией фактор-1 (HIF-1) является ключевым посредником между гипоксией и экспрессией VEGF. Важную роль играет также продукт гена опухолевого супрессора фон Хиппеля-Линдау. При нормоксических условиях H

Эффекты воздействия VEGF на эндотелиальные клетки суммированы в Табл. 1. Ниже они рассмотрены более подробно. ДЕЙСТВИЕ VEGF НА ЭНДОТЕЛИАЛЬНЫЕ КЛЕТКИ ФУНКЦИЯ 'ШШШШ^ЯЯШШШШ Проницаемость МЕХАНИЗМ Везикуловаскулярные органеллы; сосудистые поры; открытие : соединений между прилежащими эндотелиальными клетками ^Пролиферация Активация митоген-; протеин киназ (МАРК) : Инвазия Индукция металлопротеаз, uPA, uPAR, | ТТРА Миграция Активация FAK, р38, оксида азота Выживание Индукция PI3K/Akt, Вс12, А1

3 Эпителиальный фактор роста и его рецептор EGFR: структура, функции, активация EGF - полипептид, состоящий из одной цепи в 53 аминокислоты с тремя дисульфидными мостиками, которые защищают его молекулу от действия протеинкиназ. EGF потенциальный митоген, стимулирующий пролиферацию многих типов клеток, включая фибробласты, кератиноциты и эпителиальные клетки. EGF и родственный ему трансформирующий фактор роста-а (TGF-a) имеют общий рецептор, который кодируется геном с-егЬ. Рецептор EGF (EGFR)

1.3.1 Эндогенные анти-ангиогенные факторы В норме во взрослом организме сосудистая сеть находится в «спящем» состоянии, и поэтому, согласно общепризнанной быть в настоящее время теории ангиогенного которые переключателя, должны эндогенные анти-ангиогенные факторы, поддерживают ее в таком состоянии. Действительно, такие факторы есть - это тромбоспондины, ангиостатин, эндостатин и другие. К настоящему времени описано более 40 эндогенных ингибиторов ангиогенеза. Они делятся на 4 категории: инте

1.3.2 Обоснование анти-ангиогенной терании Поскольку развивающаяся опухоль зависит от сосудов, предоставляющих ей кислород и питательные вещества, возможность успеха анти-ангиогенной (то есть направленной на подавление опухолевых сосудов) терапии была высказана еще в самых клеток и, ранних работах по ангиогенезу [1, 84, 85]. И так как ангиогенез является ключевым процессом для роста опухоли, в настоящее время его подавление признано одним из важнейших направлений в разработке эффективных лека

1.3.3 Обзор современных анти-ангиогенных препаратов Моноклональиые антитела против VEGF Бевацизумаб (bevacizumab, Avastin) является гуманизированным моноклональным антителом против VEGF-A, с доказанными в пре-клинических исследованиях антиангиогенными и анти-опухолевыми свойствами. В ряде работ (фаза I) показано, что препарат не является токсичным с применяемых дозах, уменьшает проницаемость сосудов (исследование с помощью DEMRI) и уменьшает количество свободного VEGF. Исследования II фазы п

1.3.4 Гипотеза о нормализации сосудов. Потребность в надежных биомаркерах раииего ответа иа аити-аигиогенную тераиию. Как уже было сказано ранее, анти-ангиогенная терапия отлично сочетается с химиотерапией и лучевой терапией, почти всегда повышая их эффективность. Однако исследователь Ракеш Джейн заметил в этом парадокс - ведь если ингибиторы ангиогенеза разрушают сформировавшиеся в результате опухолевого роста сосуды, то должны ухудшиться доставка цитотоксических лекарств и повыситься уровен

4.2 Описание РЧ-последовательностей для релаксометрии Последовательности для Т2 и Т1 релаксометрии должны удовлетворять определенным требованиям. Во-первых, томографическое обследование пациента обязано быть максимально информативным за минимальное время исследования. Во-вторых, пока подаются радиочастотные импульсы, пациент должен быть неподвижен во избежание артефактов (искажений) движения, что ограничивает время отдельного исследования 1015 минутами. Изображения, получаемые при помощи посл

5.1 Tl-метод оценки гемодинамических параметров. Описание носледовательности SPGR. Изменение объема крови в опухоли может быть оценено при помощи нескольких фундаментально отличных МРТ-техник. Внутрисосудистые Т1-агенты (то есть влияющие, в основном, на продольное время релаксации), позволяют количественно оценивать абсолютный объем крови в опухоли. Агенты, оказывающие влияние на Т2 (спин-спиновую релаксацию) - болюсные хелаты парамагнетиков или суперпарамагнитные наночастицы тоже позволяют и

5.3 Магнитно-резонансное исследованне мышей и анализ данных с Анестезия мышей проводилась при помощи интрабрюшинной инъекции смеси кетамина (80 мг/кг) и зайлазина (9 мг/кг). Они были помещены на пластиковую флягу, наполненную теплой водой. Это преследовало две цели - усилить МР сигнал и уберечь мышей от гипотермии (атимусные мыши очень чувствительны к пониженной температуре). В хвостовую вену вводился самостоятельно изготовленный катетер 30 G, который был присоединен к капельнице с гепарино

5.4 Радиоизотопное исследование по определению фракции эритроцитов для коррекции значепий абсолютного объема крови Содержание эритроцитов в сосудах мышечной ткани и опухоли определялось при помощи набора UltraTag kit (Mallinckrodt Medical, St. Louis, MO), предназначенного для ex vivo маркировки красных кровяных телец ^'"Тс пертехнетатом. Вклад в эту часть работы внесли Вилфрид Райнхарт и Дана Ху-Лоу. Красные кровяные клетки были выделены из 11,5 мл крови сингенных мышей. Кровь маркировал