Исследование триэфирного синтеза олигонуклеотидов в присутствии арилсульфохлорида и нуклеофильных катализаторов :диссертация ... кандидата химических наук : 02.00.10

ВВЕДЕНИЕ Химический синтез олигонуклеотидов относится к числу важнейших задач биоорганической химии. Широкое использование синтетических олигонуклеотидов в биохимии, генной инженерии, молекулярной биологии служит стимулом для постоянного поиска новых подходов к синтезу этих соеданений дования протекающих при этом процессов. В последние года наибольшее применение в синтезе олигонуклеотидов нашел триэфирный метод, в котором образование межнуклеотидной связи происхо.дит путем конденсации оксигру

Глава I. НУКЯЕОФИЛБНЫЙ КАТАЛИЗ ПИРИДИНАМИ И АЗОЛАМИ В РЕАКЦИЯХ СУЛЬФОНИЛИРОВАНИЯ И ФОСФОРИЛИРОВАНИЯ ( обзор литературы ) . Образование межнуклеотидной связи в присутствии конден-. сирующих агентов представляет собой сложный процесс, включающий в себя ряд реакций, суть которых сводится к активации фосфата Р-компонента и фосфорилированию образующимся активированным произво.дным оксигруппы ОН-компонента. При проведении олигонуклеотидного синтеза в присутствии нуклеофильных катализаторов последни

. При взаимодействии арилсульфогалогенидов с незамещенным имидазолом {УгпИ ) реащия протекает через образование промежуточного продукта 16, который может стабилизироваться в результате отщепления протона, превращаясь в арилсульфоимидазолид {JrcSO^Jm )/20/. II W / / \=J ti \- -f-HX о Арилсульфоимидазолиды О (16) (AtSO^^m) - достаточно стабильные сое.дине/V-метилимида- ния /46/. Каталитическая активность имидазола в реакциях арилсульфогалогенидов значительно ниже активности зола, б

1.5. Механизм образования межнуклеотиднои триэфирнои с фосфотетразолидом /127/. Таким образом, азолы не являются ка­ связи в присутствии арилсульфотетразолидов. Первоначально для синтеза олигонуклеотидов триэфирным методом в качестве конденсирующих агентов использовали арилсульфохлориды. Образование межнуклеоти.дной триэфирнои связи этом случае происходит за 16-50 часов /1,2,128-131/. В присутствии арилсульфотриазолидов /48,53,76,77,132/ образование межнуклеотиднои триэфирнои связи протекает

2.1. Нуклеофильный катализ образования межнуклеотидной триэфирной связи в присутствии 2,4,6-триизопропилбензолсульфохлорида. До после.днего времени арилсульфохлориды - доступные конденсирующие агенты, хорошо зарекомендовавшие себя в диэфирном методе синтеза олигонуклеотидов, не получали широкого применения в триэфирном методе из-за низких скоростей образования межнуклеоти.дной триэфирной связи в их присутствии. Первым этапом наших исследований образования фосфотриэфиров при использован